<ruby id="1pfdd"><var id="1pfdd"></var></ruby>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><progress id="1pfdd"></progress><span id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><span id="1pfdd"></span>
<progress id="1pfdd"></progress>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><progress id="1pfdd"></progress><span id="1pfdd"><address id="1pfdd"></address></span>
<th id="1pfdd"></th><progress id="1pfdd"></progress>
<th id="1pfdd"></th>
<span id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><strike id="1pfdd"></strike>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><th id="1pfdd"></th>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><th id="1pfdd"></th>
<th id="1pfdd"></th>
免費咨詢熱線:
4008883135

產品分類

Product Category
技術文章
首頁 > 技術中心 > siRNA轉染

siRNA轉染

 發布時間:2022-05-07 點擊量:62

siRNA轉染

1. siRNA導入細胞的方法

siRNA導入細胞的方法有化學轉染技術、電穿孔法、磷酸鈣共沉淀技術、顯微注射和載體導入技術。技術的選擇要考慮轉入時細胞的承受能力、細胞對病毒感染的敏感性、細胞生長特性等實驗條件的限制。對于貼壁細胞來講化學轉染技術比較合適,而對于懸浮細胞,電穿孔更有效。

2. 轉染試劑的選擇

在選擇轉染試劑時,首先考慮的是特定的細胞株,而不是被導入細胞中的物質。在試劑的選擇上建議選擇線性PEI轉染試劑。

3. 篩選轉染試劑

好的轉染試劑有以下特點:如下表

特性

程度

實例

毒性

對細胞的毒性小。

轉染率

siRNA轉染過程中有較高成功

導入效果

準確

mRNA水平檢測siRNA導入的效果比用看家基因的siRNA陽性對照檢測更準確。

4. 細胞在轉染過程中死亡的處理方法

如果細胞在轉染后大多數死亡,那就說明轉染條件不適合細胞生存,需要進行進一步的優化。在優化轉染條件時需要考慮因素:轉染試劑(線性PEI轉染試劑)和細胞特異性條件。例如:siRNA與轉染試劑的比例、轉染時間、細胞傳代數和細胞密度等。

 

5. 提高難以轉染的細胞轉染效率的方法以及轉染效率的確定

如何提高難轉染細胞的轉染效率是目前研究的一個技術題。一般推薦使用電轉移法,該方法對細胞的損傷比較大,所以這種方法不太合適。熒光標記siRNA是熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡和流式細胞術常用的檢測轉染效率的方法。

6. 轉染后細胞死亡的原因及轉染條件的優化

死亡原因

解決策略

如何優化轉染條件:包括轉染前調整細胞密度、轉染濃度、檢測時間等。

 

脂質體毒性

優化轉染條件

轉染濃度過高

轉染前的細胞狀態不佳

選擇像線性PEI轉染試劑這種毒性小的轉染試劑也可以達到優化轉染條件的目的。外,如果siRNA靶向的基因對維持細胞生長非常重要,那么細胞死亡的現象可能是由基因干擾。如果檢測受到細胞死亡的影響,可以適當調整檢測時間。


香蕉久久久AV综合,王雪把双腿打开给老赵,欧美人禽杂交狂配在线视频
<ruby id="1pfdd"><var id="1pfdd"></var></ruby>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><progress id="1pfdd"></progress><span id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><span id="1pfdd"></span>
<progress id="1pfdd"></progress>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><progress id="1pfdd"></progress><span id="1pfdd"><address id="1pfdd"></address></span>
<th id="1pfdd"></th><progress id="1pfdd"></progress>
<th id="1pfdd"></th>
<span id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><strike id="1pfdd"></strike>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><th id="1pfdd"></th>
<th id="1pfdd"><noframes id="1pfdd"><th id="1pfdd"></th>
<th id="1pfdd"></th>
<蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链>